在液相色譜儀的精密世界中，每一個部件都扮演著不可或缺的角色。它們協(xié)同工作，將復(fù)雜的混合物分離成單一的純凈組分，為我們揭示樣品的秘密。然而，就像任何高精度的儀器一樣，液相色譜儀也需要定期的維護與保養(yǎng)，以確保其長期穩(wěn)定運行和準(zhǔn)確的分析結(jié)果。接下來，就讓我們一起探索液相色譜儀六大核心部件的細(xì)致養(yǎng)護秘訣，讓這臺“化學(xué)偵探”始終保持最佳狀態(tài)！

l流動相溶劑瓶：清澈的起點

流動相溶劑瓶，如同液相色譜儀的“水源地”，其清澈與純凈直接關(guān)系到整個分析過程的準(zhǔn)確性。為了確保溶劑的純凈，我們需要定期更換溶劑，并檢查溶劑瓶的密封性，避免外界污染物的侵入。同時，對于易揮發(fā)的有機溶劑，如乙腈，我們應(yīng)使用棕色溶劑瓶存儲，減少光照引起的聚合反應(yīng)，最好是能做到每天進行超聲和過濾。這一過程就像是為“水源地”定期換水和濾水，確保水質(zhì)清澈，為整個分析流程提供堅實的保障。

l高壓泵：心臟的穩(wěn)定律動

高壓泵，作為液相色譜儀的“心臟”，其穩(wěn)定的工作狀態(tài)對于整個系統(tǒng)的運行至關(guān)重要。為了保持高壓泵的穩(wěn)定輸出，我們需要定期檢查并清洗流路系統(tǒng)，確保流動相中無氣泡、無雜質(zhì)。同時，注意檢查過濾頭和單向閥是否堵塞，及時超聲清洗或更換，避免堵塞導(dǎo)致的壓力波動。這一過程就像是給“心臟”做定期體檢，確保它始終保持穩(wěn)定的律動。當(dāng)然，想要一個穩(wěn)壓的高壓泵，泵本身的設(shè)計也非常重要的，能主動壓力脈動抑制的高壓泵，才是智能的好的輸液泵。科諾美憑著強大的研發(fā)實力，逐代迭代，開發(fā)出能主動進行壓力脈動的超高壓輸液泵，雙重保證了流速的穩(wěn)定和壓力的平穩(wěn)。

l自動和手動進樣器：樣品的精準(zhǔn)傳遞

進樣器，作為樣品的“守門員”，其精準(zhǔn)傳遞樣品的能力直接影響到分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。為了確保進樣器的正常工作，我們需要定期清洗進樣針和進樣器，避免樣品殘留導(dǎo)致的交叉污染。同時，對于手動進樣器，我們還需注意操作技巧，如使用專用進樣針、插針到底、及時清洗等，確保樣品的精準(zhǔn)傳遞。這一過程就像是訓(xùn)練一位精準(zhǔn)的“守門員”，確保每一次傳遞都準(zhǔn)確無誤。

l色譜柱：分離的藝術(shù)殿堂

色譜柱，作為液相色譜儀的“靈魂”，其高效的分離能力是整個分析過程的核心。為了保護色譜柱，我們需要避免壓力和溫度的急劇變化，選擇合適的流動相，避免將復(fù)雜樣品直接注入柱內(nèi)等。同時，定期用強溶劑沖洗色譜柱，清除殘留雜質(zhì)，保持其高效分離能力。這一過程就像是維護一座“藝術(shù)殿堂”，確保它始終保持著最佳的分離效果。

1.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩（如前所述）。

2.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/span>

3.色譜柱反沖，反沖能快速沖出雜質(zhì)和降低本身壓力，但是一定根據(jù)具體情況確認(rèn)是否反沖， 不是所有色譜柱都能反沖的。

4.選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

5.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

6.經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50~75ml。

下面列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序，作為參考：

硅膠柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次沖洗，然后再以相反順序依次沖洗，所有溶劑都必須嚴(yán)格脫水。甲醇能洗去殘留的強極性雜質(zhì)，已烷使硅膠表面重新活化。

反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次沖洗，再以相反順序依次沖洗。

如果下一步分析用的流動相不含緩沖液，那么可以省略最后用水沖洗這一步。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質(zhì)，在甲醇（乙腈）沖洗時重復(fù)注射100~200μl四氫呋喃數(shù)次有助于除去強疏水性雜質(zhì)。四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時也注射二甲亞砜數(shù)次。此外，用乙腈、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脫能除去蛋白質(zhì)污染。

陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗，陰離子交換柱可用稀堿緩沖液沖洗，除去交換性能強的鹽，然后用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有機物）、甲醇、水依次沖洗。

7.保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過晚上或更長時間。

8.色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗；另一種可能是大分子進入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。

9.通常以硅膠為基質(zhì)的色譜柱，只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時間后，可能有一些吸附作用強的物質(zhì)保留于柱頂，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀Ｐ碌纳V柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降，這時也可補加填料使柱效恢復(fù)。

每次工作完后，要用洗脫能力強的洗脫液梯度沖洗，例如ODS柱宜用甲醇水沖洗至基線平衡。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動相時，使用完后應(yīng)用無鹽對應(yīng)流動相沖洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕質(zhì)不銹鋼管道，不宜長期與之接觸。

l檢測器：敏銳的“眼睛”

檢測器，作為液相色譜儀的“眼睛”，其敏銳的捕捉能力對于分析結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。為了保持檢測器的敏銳度，我們需要定期清洗和檢查檢測器的外殼和內(nèi)部光路系統(tǒng)，確保無灰塵、無污染物。同時，注意避免強光和強電磁場的干擾，確保檢測器能夠準(zhǔn)確捕捉樣品信號。這一過程就像是給“眼睛”做定期保養(yǎng)，確保它始終保持著敏銳的捕捉能力。

l系統(tǒng)整體：和諧的交響樂

除了以上五大核心部件的保養(yǎng)外，我們還需要注意系統(tǒng)整體的養(yǎng)護。這包括定期更換系統(tǒng)內(nèi)的過濾器、檢查管路連接是否緊固、避免長時間停機導(dǎo)致系統(tǒng)內(nèi)部干燥等。同時，保持實驗室的清潔和整潔也是非常重要的，避免灰塵和污染物對儀器造成損害。這一過程就像是維護一支和諧的交響樂團隊，確保每個部件都能夠在最佳狀態(tài)下協(xié)同工作，共同演奏出美妙的科學(xué)樂章。

? 在養(yǎng)護液相色譜儀的過程中，我們不僅要注意技術(shù)細(xì)節(jié)，更要培養(yǎng)一種對科學(xué)的敬畏之心和對儀器的愛護之情。通過細(xì)心呵護這些精密的儀器，我們能夠更好地探索科學(xué)的奧秘，為人類的進步和發(fā)展貢獻(xiàn)自己的力量。

【來源：科諾美（北京）科技有限公司】?